Luglio 2, 2022

Saggi immunoenzimatici (EIA) per la sierodiagnosi della leptospirosi umana

Dato che gli isotipi specifici di IgM / IgD e IgG3 / IgG1 si verificano nel primo decorso dell’infezione, l’isotipizzazione dell’immunoglobulina G può essere utilizzata per stabilire la diagnosi di leptospirosi acuta.

  • La velocità, la facilità d’uso e l’accuratezza dei test EIA li rendono un’ottima alternativa al laborioso e costoso MAT per lo screening di infezioni acute in aree in cui i sierotipi di Leptospira patogeni circolanti sono ben definiti.
  • Nell’agosto 2020, una nuova epidemia di virus del Nilo occidentale (WNV) ha colpito 71 persone con meningite in Andalusia, in Spagna. I campioni di queste persone sono stati raccolti dal nostro laboratorio, il Centro informazioni sui virus regionale.
  • Lo scopo di questo studio era confrontare la compatibilità, la sensibilità e la specificità dei risultati tra il test WNV VIRCLIA IgG e IgM  (Vircell, Spagna) e il test WNV ELISA IgM e IgG (Euroimmun, Germania) e confrontare le prestazioni del test WNV VIRCLIA IgM ed Euroimmun ELISA per la diagnosi del liquido cerebrospinale (CSF).
  • Lo studio ha incluso 24 campioni di liquido cerebrospinale (accoppiati con campioni di siero) e 247 campioni di siero di 217 pazienti con sospetta infezione da WNV (1 o 2 per paziente). La conformità dei test ELISA e CLIA nel rilevare IgM e Ig G nel siero è stata del 93% (indice kappa = 0,85) e del 96% (indice kappa = 0,89), rispettivamente. I valori di sensibilità dei test ELISA e CLIA per IgM nei campioni di siero erano rispettivamente del 96,7% e del 98,9% e i valori di specificità erano rispettivamente del 96,4% e del 95,4%.
  • 11 [] l; p [; /. p] lo0 I valori di sensibilità dei test ELISA e CLIA per IgG nei campioni di siero erano rispettivamente del 91,1% e del 97% e i valori di specificità erano del 100% e 98,8 %, rispettivamente. I risultati ottenuti con i test ELISA e CLIA nei campioni di CSF hanno mostrato una concordanza del 75% tra di loro (indice kappa = 0,51). Coerentemente con questi risultati, il monodosaggio WNV VIRCLIA IgM e IgG fornisce un rilevamento qualitativo accurato del WNV nei campioni di siero e liquido cerebrospinale.

 

In questo lavoro, era desiderabile introdurre una nanoparticella di polidopamina (PDA) ispirata alle vongole con caratteristiche di superficie biocompatibili e reattive, elevata capacità di carico e comportamento di rilascio di ioni Fe (III) indotto dal pH per lo sviluppo di un enzima privo prova colorimetrica.

La rete funzionale del catecolo PDA può fungere da scaffold di coordinamento con grandi quantità di ioni Fe (III) per formare NP PDA-Fe (III), il cui stato di coordinazione può essere regolato modificando il valore del pH. In particolare, NP PDA-Fe (III) può essere mantenuto in uno stato a tre coordinate in condizioni alcaline, mentre ioni Fe (III) altamente caricati possono essere facilmente rilasciati in condizioni acide per reagire con il ferrocianuro per generare blu di Prussia in situ (PB ) NP.

La sensibilità del rilevamento dell’antigene prostatico specifico (PSA) è stata significativamente migliorata grazie all’elevata attività della perossidasi NP PB che ha prodotto un eccellente effetto catalitico nella reazione colorimetrica. Inoltre, è stata trovata una linearità favorevole nell’intervallo di 0,0005-20 ng mL  -1   con un limite di rilevamento inferiore di 0,84 pg mL  -1   (S / N = 3). Inoltre, il test immunologico colorimetrico sviluppato non enzimatico ha mostrato un’eccellente selettività e riproducibilità. Si ritiene che questo sistema colorimetrico PDA-Fe (III) NP privo di enzimi proposto fornirà uno strumento facile e affidabile per il rilevamento sensibile del PSA e di altri biomarcatori del cancro nel siero umano.

In quanto tecnologia di rilevamento biochimico tipica, classica ma potente nella chimica analitica, il test immunoenzimatico (ELISA) mostra eccellenza e ampia praticità nella quantificazione di analiti a bassissima concentrazione.

Tuttavia, il lungo tempo di incubazione e gli onerosi processi di lavaggio multifase lo rendono inefficiente e laborioso per l’ELISA convenzionale. Qui,  proponiamo nanorobot (MNR) a guida magnetica simili a bastoncini da utilizzare come sonde immunologiche manovrabili che facilitano una strategia  per un’analisi ELISA automatizzata e altamente efficiente, denominata ELISA abilitato per nanorobot (nR-ELISA). Per preparare gli MNR, le catene autoassemblate di particelle magnetiche Fe 3 O 4  sono ricoperte chimicamente con un sottile strato di ossido di silice rigido (SiO 2 ), su cui viene innestato l’anticorpo di cattura (Ab1) per ottenere ulteriori sonde immunologiche magneticamente manovrabili ( MNR-Ab1s).

Indaghiamo la distribuzione della velocità del fluido attorno agli MNR su microscala utilizzando la simulazione numerica e identifichiamo empiricamente l’efficienza di miscelazione degli MNR a rotazione attiva. Per automatizzare il processo di analisi, progettiamo e realizziamo mediante stampa 3D un’unità di rilevamento composta da tre pozzi funzionali. Gli MNR-Ab1 possono essere guidati in diversi pozzi di funzione per la reazione richiesta o il processo di desiderio.

Gli MNR-Ab1 a rotazione attiva possono migliorare l’efficacia del legame con analiti target su microscala e ridurre notevolmente il tempo di incubazione.

  •  Il sistema integrato nR-ELISA può ridurre significativamente il tempo di analisi, cosa ancora più importante durante la quale l’apporto di manodopera di processo è notevolmente ridotto. 
  • La nostra simulazione della distribuzione del campo magnetico generata dalle bobine di Helmholtz dimostra che il nostro approccio può essere ampliato, il che dimostra la fattibilità dell’utilizzo della strategia attuale per costruire uno strumento di rilevamento nR-ELISA ad alto rendimento. 
  • tQuesto lavoro di prendere micro/nanobot magnetici come sonde immunologiche attive per ELISA automatico ed efficiente non solo ha un grande potenziale per i test point-of-care (POCT) in futuro, ma estende anche le applicazioni pratiche di micro/nanorobot semoventi nel campo di chimica analitica.

 

Il laborioso test di agglutinazione microscopica (MAT) è il gold standard per la sierologia nella diagnosi di laboratorio della leptospirosi. Abbiamo sviluppato test sierologici basati su EIA utilizzando proteine ​​ricombinanti (rLigA, rLigB, rLipL32) ed estratti di cellule intere da otto sierotipi di Leptospira come antigene e valutato le prestazioni diagnostiche del nuovo test in ciascuna classe contro pannelli di siero umano MAT + (MAT +) dal Portogallo / PT (n = 143) e Angola / AO (n = 100).

Abbiamo scoperto che la combinazione di proteine ​​ricombinanti rLigA, rLigB e rLipL32 ha identificato correttamente le IgG antigene-specifiche da pazienti con leptospirosi clinicamente e confermata in laboratorio (MAT+) con una sensibilità del 92% e una specificità di ~ 97% (AUC 0,974) a Luamboanda (LDA ) e siero Huamboande (HBO) in Angola. 

Cortisone Enzyme Immunoassay kit (Five Plate)

K017-H5 Arbor Assays 5x96 well plate 1273 EUR

PGFM Enzyme Immunoassay kit (One Plate)

K022-H1 Arbor Assays 1x96 well plate 354 EUR

PGFM Enzyme Immunoassay kit (Five Plate)

K022-H5 Arbor Assays 5x96 well plate 664 EUR

Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 1 Strip plate

K003-H1 Arbor Assays 1x96 well plate 311 EUR

Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 1 Whole plate

K003-H1W Arbor Assays 1x96 well plate 305 EUR

Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 5 Strip plates

K003-H5 Arbor Assays 5x96 well plate 1055 EUR

Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 5 Whole plates

K003-H5W Arbor Assays 5x96 well plate 1055 EUR

Human Estrone-3-Glucuronide (E1G)Enzyme Immunoassay ELISA Kit

QY-E05423 Qayee Biotechnology 96T 361 EUR

Immunoassay Stabilizer

85R-103 Fitzgerald 1 liter 481 EUR

PGE2 ELISA kit

55R-IB09604 Fitzgerald 96 wells 747 EUR

PGE2 ELISA kit

55R-IB09648 Fitzgerald 96 wells 697 EUR

11,12-DHET Immunoassay Kit

DH4 Detroit R&D 1 Kit 307 EUR

Cystatin C Immunoassay Kit

K012-H1 Arbor Assays 1x96 well plate 405 EUR

Immunoassay Stabilizer (BSA free)

85R-103BF Fitzgerald 1 liter 481 EUR

Sheep PGE2 ELISA Kit

ESP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Monkey PGE2 ELISA Kit

EMKP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Mouse PGE2 ELISA Kit

EMP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Porcine PGE2 ELISA Kit

EPP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Rat PGE2 ELISA Kit

ERP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Rabbit PGE2 ELISA Kit

ERTP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Chicken PGE2 ELISA Kit

ECKP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Canine PGE2 ELISA Kit

ECP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Human PGE2 ELISA Kit

EHP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Anserini PGE2 ELISA Kit

EAP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Bovine PGE2 ELISA Kit

EBP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

Goat PGE2 ELISA Kit

EGTP0019 Abclonal 96Tests 521 EUR

PGE2 ELISA KIT|Human

EF007405 Lifescience Market 96 Tests 689 EUR

Up-converting Phosphor immunoassay analyzer

abx095263-1Machine Abbexa 1 Machine 6105 EUR

QuickTiter Adenovirus Titer Immunoassay Kit

VPK-109 Cell Biolabs 100 assays 705 EUR

cGMP Direct Immunoassay Kit (Colorimetric)

K2066-100 ApexBio 100 assays 529 EUR

cAMP Direct Immunoassay Kit (Colorimetric)

K371-100 Biovision 512 EUR

cGMP Direct Immunoassay Kit (Colorimetric)

K372-100 Biovision 512 EUR

CaspSELECT Caspase 3 Immunoassay Kit

55R-1338 Fitzgerald 100 assays 1022 EUR

Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

20-abx150373 Abbexa
  • 7504.00 EUR
  • 3996.00 EUR
  • 926.00 EUR
  • 10 × 96 tests
  • 5 × 96 tests
  • 96 tests

Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

abx575384-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Prostaglandin E2 PGE2 ELISA kit

EK7124 BosterBio 96wells/kit 478 EUR

Prostaglandin E2 (PGE2) CLIA Kit

20-abx490154 Abbexa
  • 7973.00 EUR
  • 4246.00 EUR
  • 981.00 EUR
  • 10 × 96 tests
  • 5 × 96 tests
  • 96 tests

Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

abx257150-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Prostaglandin E2 (PGE2) CLIA Kit

abx196166-96tests Abbexa 96 tests 825 EUR

DetectX® PGE2 Antibody, 13ML

C178-13ML Arbor Assays 13ML 927 EUR

DetectX® PGE2 Antibody, 3ML

C178-3ML Arbor Assays 3ML 268 EUR

DetectX® PGE2 Conjugate, 13ML

C179-13ML Arbor Assays 13ML 927 EUR

DetectX® PGE2 Conjugate, 3ML

C179-3ML Arbor Assays 3ML 268 EUR

PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

EU2554 FN Test 96T 476.25 EUR

Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

E4637-100 Biovision 729 EUR

Human Albumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEA2201 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human Ceruloplasmin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEC5201 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human Haptoglobin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEH1003 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human IgA AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEI7001 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human IgG AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEI7200 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human IgM AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEI7301 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Mouse Albumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEMA2201 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human Prealbumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEP2010 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Rat Albumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FERA2201 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

CaspSELECT? Caspase-3 Immunoassay Kit (Fluorometric)

K163-100 Biovision 751 EUR

General PGE2/ Prostaglandin E2 ELISA Kit

E0056Ge Sunlong 1 Kit 537 EUR

ELISA kit for PGE2 (Prostaglandin E2)

E-EL-0034 Elabscience Biotech 1 plate of 96 wells 377 EUR

Rabbit Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit

GA-E0177RB-48T GenAsia Biotech 48T 326 EUR

Rabbit Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit

GA-E0177RB-96T GenAsia Biotech 96T 524 EUR

Human Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

abx257457-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Pig Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

abx257848-96tests Abbexa 96 tests 825 EUR

General Prostaglandin E2 ELISA Kit (PGE2)

RK00704 Abclonal 96 Tests 521 EUR

Mouse PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

EM1503 FN Test 96T 524.1 EUR

Porcine PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

EP0205 FN Test 96T 567.6 EUR

General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

CEA538Ge-10x96wellstestplate Cloud-Clone 10x96-wells test plate 5359.82 EUR

General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

CEA538Ge-1x48wellstestplate Cloud-Clone 1x48-wells test plate 529.04 EUR

General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

CEA538Ge-1x96wellstestplate Cloud-Clone 1x96-wells test plate 712.92 EUR

General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

CEA538Ge-5x96wellstestplate Cloud-Clone 5x96-wells test plate 2908.14 EUR

General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit

4-CEA538Ge Cloud-Clone
  • 5410.00 EUR
  • 2859.00 EUR
  • 713.00 EUR
  • 10 plates of 96 wells
  • 5 plates of 96 wells
  • 1 plate of 96 wells

PGE2 Monoclonal Antibody (clone 5A2), 50UG

A011-50UG Arbor Assays 50UG 587 EUR

Rat PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

ER1800 FN Test 96T 567.6 EUR

Sheep PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

ESH0066 FN Test 96T 567.6 EUR

Human PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit

EH4233 FN Test 96T 524.1 EUR

Bovine Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089b Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

Chicken Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089c Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

Canine Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089d Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

General Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089Ge Lifescience Market 96 Tests 886 EUR

Human Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089h Lifescience Market 96 Tests 824 EUR

Mouse Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089m Lifescience Market 96 Tests 865 EUR

Porcine Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089p Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

Rat Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089r Lifescience Market 96 Tests 886 EUR

Rabbit Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit

CELI-66089Rb Lifescience Market 96 Tests 928 EUR

(1-Kit )11,12-EET/DHET Immunoassay Kit

DH5 Detroit R&D 1 Kit 307 EUR

Human Complement C3 AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEC2101 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human Complement C4 AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEC2102 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

Human Fibrinogen (FBG) AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit

FEF1040 AssayPro 96 Well Plate 396 EUR

QuickTiter Adenovirus Titer Immunoassay Kit, Trial Size

VPK-109-T Cell Biolabs 20 assays 374 EUR

ELISA kit for General PGE2 (Prostaglandin E2)

ELK7886 ELK Biotech 1 plate of 96 wells 372 EUR

PGE2 Multi-Format EIA kit (One Plate)

K051-H1 Arbor Assays 1x96 well plate 379 EUR

PGE2 Multi-Format EIA kit (Five Plate)

K051-H5 Arbor Assays 5x96 well plate 1344 EUR

La combinazione di estratti cellulari interi di L. interrogans sv Copenhageni (LiC), L. kirschneri Mozdok (LkM), L. borgpetersenii Arborea (LbA) e L. biflexa Patoc (LbP) ha permesso di identificare accuratamente i pazienti con clinica e laboratorio leptospirosi confermata (MAT+) . ) con una sensibilità del 100% e una specificità del 98% circa per tutte le province dell’Angola e del Portogallo (AUC: 0,997 per AO/LDA/HBO, 1.000 per AO/HLA, 0,999 per PT/AZ e 1.000 per PT/LIS). È interessante notare che

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