Fluorescente: proteine ​​di fusione a catena singola Fv fluorescenti verdi

1. È stato riscontrato che un anticorpo monoclonale (MAb) di ratto anti-topo, M1/42, reagisce con gli antigeni H-2 degli aplotipi a, b, d, j, k, siu (tutti gli aplotipi testati). Questo anticorpo, dopo essersi legato alle cellule e aver reagito con   FITC  –    Ig anti-ratto coniugato , può essere utilizzato per quantificare l’espressione di H-2 su diversi tipi cellulari.
2. L’anticorpo è stato anche utile per confrontare i prodotti H-2 precipitati da diversi aplotipi. Perline di sefarosio-4B accoppiate a M1/42 sono state utilizzate per purificare gli antigeni H-2d mediante cromatografia  di affinità .
3. Molecole di H-2 pure sono state eluite dalla colonna in DOC allo 0,5%, NaCl 0,65 M, Tris 20 mM, pH 8,0, producendo da 110 a 180 microgrammi di cellule tumorali H-2d / 10 (10) P815. Questo anticorpo, utilizzato in serie con MAb specifici per H-2Kk 11-4.1, ha consentito la purificazione di Dk e Dd rispettivamente dalle cellule RDM-4 e YAC.

H-2d   purificato   mediante cromatografia su colonna su M1 / ​​42 è risultato sierologicamente e biologicamente attivo come determinato dal rebinding di MAb, dall’inibizione della lisi cellulare da parte di alloantisieri più complemento e dalla capacità di stimolare il CTL alloreattivo. Questo anticorpo e i protocolli descritti dovrebbero essere utili per la preparazione di quantità relativamente grandi di antigeni H-2 multipli.