Luglio 2, 2022

Dipendenza metabolica della deformabilità dei globuli rossi

Una strategia per ridurre la citotossicità e raggiungere l’efficacia estetica dopo 15 minuti di sbiancamento dentale in studio

  1. Valutare l’efficacia estetica in vitro e la citotossicità di un gel sbiancante contenente il 35% di perossido di idrogeno (BG-35% H  2  O  2  ) applicato a vari intervalli di tempo su uno smalto rivestito o meno con biomateriali polimerici.
  2. Sono stati utilizzati scaffold in nanofibra (NSc) e un catalizzatore di supporto (PrCa) per rivestire i dischi di smalto/dentina bovina prima dell’applicazione di BG-35% H  2  O  2  , secondo i seguenti gruppi: controllo G1-negativo (NC, nessun trattamento) ; G2, G3 e G4-BG-35% H  2  O  2   applicati per 3 × 15, 2 × 15 e 15 min; G5, G6 e G7-BG-35% H  2  O  2   applicati su smalto rivestito con NSc e PrCa 3 × 15; 2×15 e 15 min. Il mezzo di coltura con i componenti del gel diffuso del disco è stato applicato alle cellule MDPC-23, che sono state valutate per la vitalità (VB), l’integrità della membrana (IM) e lo stress ossidativo (OxS). La quantità di H  2  O  2 È stata anche analizzata l’efficacia diffusa ed estetica (ΔE / ΔWI) dei tessuti dei denti (ANOVA / Tukey; p <0,05).
  3. Solo G7 era simile a G1 in termini di VB (p> 0,05). Il valore più basso della diffusione di H  2  O  2   si è verificato in G4 e G7, dove le cellule hanno mostrato il valore più basso di OxS rispetto a G2 (p <0,05). Nonostante il fatto che G5 mostrasse il ΔE più alto nei restanti gruppi (p <0,05), l’efficacia estetica osservata in G7 era simile a G2 (p> 0,05). ΔWI ha indicato un maggiore effetto sbiancante nei gruppi G5, G6 e G7 (p <0,05).
  4.  Coprire lo smalto dei denti con biomateriali polimerici ha ridotto il tempo e la citotossicità di BG-35% H  2  O  2  .
  5.  La copertura dello smalto dei denti con biomateriali polimerici consente un’applicazione più sicura e rapida di BG-35% H  2  O  2   .
  6. citotossicità; Sbiancamento dei denti; Odontoblasti; Biomateriali polimerici.

Analisi dell’N-glicoproteoma plasmatico umano mediante sottrazione per immunoaffinità, chimica dell’idrazide e spettrometria di massa.

  • L’enorme complessità, l’ampia gamma dinamica delle abbondanze relative delle proteine ​​di interesse (oltre 10 ordini di grandezza) e l’enorme eterogeneità  (dovuta a modificazioni post-traduzionali come la glicosilazione) del proteoma plasmatico umano minano gravemente le metodologie analitiche esistenti.
  • Qui descriviamo un approccio per analizzare ampiamente le N-  glicoproteine ​​del plasma umano  utilizzando una combinazione di sottrazione dell’affinità immunitaria e  cattura della glicoproteina   per ridurre sia l’intervallo di concentrazione delle proteine ​​che la complessità complessiva del campione.
  • Sei proteine ​​plasmatiche ad alta abbondanza sono state rimosse simultaneamente utilizzando una colonna preconfezionata di anticorpi immobilizzati. Le glicoproteine ​​N-linked sono state quindi  catturate dal plasma impoverito utilizzando una resina idrazide e digerite enzimaticamente, e gli N-glicopeptidi legati sono stati rilasciati utilizzando la peptide-N-glicosidasi F (PNGasi F).
  • Dopo un elevato frazionamento di scambio cationico (SCX), i peptidi deglicosilati sono stati analizzati mediante cromatografia liquida capillare a fase inversa combinata con spettrometria di massa tandem (LC-MS / MS).
  • Utilizzando criteri rigorosi, sono stati sicuramente identificati 2053 diversi N-glicopeptidi, comprese 303 N-  glicoproteine ​​non ridondanti  .
  • Questa strategia  di arricchimento   ha migliorato significativamente la rilevazione e ha permesso l’identificazione di un certo numero di proteine ​​a bassa abbondanza, come la proteina antagonista del recettore dell’interleuchina-1 (circa 200 pg/ml), la catepsina L (circa 1 ng/ml) e il fattore di crescita trasformante beta 1 (circa 2 ng/ml).
  • Sono stati identificati un totale di 639 siti di N-glicosilazione e inizialmente hanno dimostrato l’elevata precisione complessiva di queste assegnazioni del sito di glicosilazione, valutata mediante un’accurata misurazione della massa utilizzando la cromatografia liquida ad alta risoluzione accoppiata alla spettrometria di massa della risonanza ciclotronica ionica a trasformata di Fourier (LC-FTICR).

È stato studiato il contributo dello stato metabolico degli eritrociti umani al mantenimento della deformabilità cellulare durante e dopo l’incubazione del siero in vitro fino a 28 ore.

  •  La perdita iniziale di deformabilità della membrana è diventata evidente tra 4 e 6 ore quando i livelli cellulari  di adenosina trifosfato  (ATP) erano circa il 70% dei valori iniziali. La deformabilità del film è poi rimasta stabile tra le 6 e le 10 ore.
  • Dopo 10 ore, quando l’ATP cellulare era sceso a <15% del valore basale, i cambiamenti paralleli progressivi del calcio dei globuli rossi aumentavano del 400% entro 24 ore. e nella viscosità della sospensione di globuli rossi, che è aumentata del 500-750% dopo 24 ore. .
  • C’era anche un’ulteriore progressiva diminuzione della deformabilità della membrana, come riflesso in un aumento del 1000% della pressione negativa richiesta per deformare la membrana.
  • La filtrabilità dei globuli rossi è scesa a zero quando si è verificata una trasformazione da disco a sfera. Questi cambiamenti sono stati accompagnati da un aumento della quantità di emoglobina residua e di proteine ​​non emoglobiniche. La rigenerazione dell’ATP nelle cellule esaurite mediante incubazione con adenosina ha comportato un’inversione significativa di questi cambiamenti, anche in presenza di ouabain.
  • L’incorporazione di calcio nelle ombre ricostituite preparate da globuli rossi freschi imitava lo stato di esaurimento e l’incorporazione di ATP, etilendiamminotetraacetato (EDTA) e magnesio nelle cellule esaurite imitava l’effetto dell’adenosina nelle cellule impoverite intatte. L’ATP aggiunto esternamente alle cellule esaurite entro 24 ore non ha avuto alcun effetto.
  • L’introduzione simultanea di EDTA, ATP o magnesio insieme al calcio nelle ombre ricostruite ha impedito una marcata riduzione della deformabilità causata dal solo calcio. Incorporazione di adenosina difosfato (ADP), nicotinamide adenina dinucleotide (NAD), NAD fosfato (NADP), NADP, forma ridotta (NADPH), glutatione, forma ridotta (GSH),   inosina trifosfato  (ITP),   guanosina trifosfato  (GTP) e   trifosfato    ( GTP
  • Questi dati suggeriscono che il ruolo principale dell’ATP nel mantenimento della vitalità dei globuli rossi è correlato alla conservazione della deformabilità della membrana dei globuli rossi. 

General Uridine Triphosphate (UTP) ELISA Kit

CEG822Ge-1x96wellstestplate Cloud-Clone 1x96-wells test plate 728.32 EUR

General Uridine Triphosphate (UTP) ELISA Kit

CEG822Ge-5x96wellstestplate Cloud-Clone 5x96-wells test plate 2977.44 EUR

General Uridine Triphosphate (UTP) ELISA Kit

4-CEG822Ge Cloud-Clone
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General Uridine Triphosphate ELISA Kit (UTP)

RK00730 Abclonal 96 Tests 521 EUR

Uridine Triphosphate (UTP) CLIA Kit

20-abx490526 Abbexa
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Uridine triphosphate (trisodium salt)

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Uridine 5'-triphosphate trisodium salt hydrate

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Uridine 5'-triphosphate trisodium salt hydrate

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Uridine -5'-triphosphate UTP], 100 mM solution

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ELISA kit for IP3 (Inositol Triphosphate)

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ELISA kit for General Adenosine triphosphate

EK4295 SAB 96 tests 603 EUR

ELISA kit for Mouse Uridine phosphorylase 1

EK3986 SAB 96 tests 553 EUR

ELISA kit for General ATP (Adenosine Triphosphate)

ELK7901 ELK Biotech 1 plate of 96 wells 372 EUR

ELISA kit for General IP3 (Inositol Triphosphate)

ELK8148 ELK Biotech 1 plate of 96 wells 372 EUR

for Uridine Cytidine Kinase 2 (UCK2)ELISA kit

SEC584Hu-10x96wellstestplate Cloud-Clone 10x96-wells test plate 4731.5 EUR

for Uridine Cytidine Kinase 2 (UCK2)ELISA kit

SEC584Hu-1x48wellstestplate Cloud-Clone 1x48-wells test plate 477.3 EUR

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SEC584Hu-1x96wellstestplate Cloud-Clone 1x96-wells test plate 639 EUR

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SEC584Hu-5x96wellstestplate Cloud-Clone 5x96-wells test plate 2575.5 EUR

ELISA Kit for Uridine Cytidine Kinase 2 (UCK2)

4-SEC584Hu Cloud-Clone
  • 4782.00 EUR
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ELISA kit for Mouse UPP1 (Uridine Phosphorylase 1)

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ELISA kit for Mouse Uridine phosphorylase 1 (UPP1)

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ELISA kit for Mouse Uridine phosphorylase 1 (UPP1)

KTE70035-5platesof96wells Abbkine 5 plates of 96 wells 2252 EUR

ELISA kit for Mouse Uridine phosphorylase 1 (UPP1)

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ELISA kit for Human UPP2 (Uridine Phosphorylase 2)

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ELISA kit for Human UPP1 (Uridine Phosphorylase 1)

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Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed

ELISA-1 Alpha Diagnostics 1 202 EUR

for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 2 (ENTPD2)ELISA kit

SEJ152Hu-10x96wellstestplate Cloud-Clone 10x96-wells test plate 5189.65 EUR

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for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 2 (ENTPD2)ELISA kit

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ELISA Kit for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 2 (ENTPD2)

4-SEJ152Hu Cloud-Clone
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for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 3 (ENTPD3)ELISA kit

SEJ153Hu-10x96wellstestplate Cloud-Clone 10x96-wells test plate 4731.5 EUR

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for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 3 (ENTPD3)ELISA kit

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for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 3 (ENTPD3)ELISA kit

SEJ153Hu-5x96wellstestplate Cloud-Clone 5x96-wells test plate 2575.5 EUR

ELISA Kit for Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 3 (ENTPD3)

4-SEJ153Hu Cloud-Clone
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ELISA kit for Rat Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1

EK4893 SAB 96 tests 603 EUR

ELISA kit for Human Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1

EK4894 SAB 96 tests 603 EUR

Uridine

GP7250-100G Glentham Life Sciences 100 g 110 EUR

Uridine

GP7250-1G Glentham Life Sciences 1 g 40 EUR

Uridine

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Uridine

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Uridine

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Uridine

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Uridine

B1473-50 ApexBio 50 mg 128 EUR

Uridine

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Uridine

TB00754 ChemNorm 8XX100mg 274 EUR

ELISA kit for Human ENTPD1 (Ectonucleoside Triphosphate Diphosphohydrolase 1)

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ELISA kit for Human Deoxyuridine 5'-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial

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Adenosine Triphosphate (ATP) ELISA Kit

DLR-ATP-Ge-48T DL Develop 48T 568 EUR

Adenosine Triphosphate (ATP) ELISA Kit

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Inositol Triphosphate (IP3) ELISA Kit

DLR-IP3-Ge-48T DL Develop 48T 506 EUR

Inositol Triphosphate (IP3) ELISA Kit

DLR-IP3-Ge-96T DL Develop 96T 658 EUR

Inositol Triphosphate (IP3) ELISA Kit

abx571965-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Adenosine Triphosphate (ATP) ELISA Kit

abx574124-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Adenosine Triphosphate (ATP) ELISA Kit

20-abx150324 Abbexa
  • 7504.00 EUR
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  • 10 × 96 tests
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Inositol Triphosphate (IP3) ELISA Kit

abx257875-96tests Abbexa 96 tests 668 EUR

Inositol Triphosphate (IP3) ELISA Kit

20-abx258319 Abbexa
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IP3(Inositol Triphosphate) ELISA Kit

EU3119 FN Test 96T 476.25 EUR

Adenosine triphosphate ELISA Kit (OKEH02624)

OKEH02624 Aviva Systems Biology 96 Wells 727 EUR

Inositol Triphosphate ELISA Kit (OKCD02270)

OKCD02270 Aviva Systems Biology 96 Wells 962 EUR

Rat Inositol Triphosphate ELISA kit

E02I0011-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

Rat Inositol Triphosphate ELISA kit

E02I0011-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 520 EUR

Rat Inositol Triphosphate ELISA kit

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Human Inositol Triphosphate ELISA kit

E01I0011-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

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Human Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Mouse Inositol Triphosphate ELISA kit

E03I0011-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

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Mouse Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Mouse Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Rat Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Pig Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Pig Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Pig Inositol Triphosphate ELISA kit

E07I0011-192T BlueGene 192 tests 1270 EUR

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Goat Adenosine Triphosphate ELISA kit

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Goat Inositol Triphosphate ELISA kit

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Inositol Triphosphate (IP3) ELISA Kit

E4792-100 Biovision 96 assays 581 EUR

 

  • Si suggerisce che i cambiamenti osservati nelle proprietà fisiche degli eritrociti impoveriti di ATP rappresentino cambiamenti sol-gel dipendenti dall’ATP-calcio all’interfaccia tra la membrana e l’interno della cellula e che l’equilibrio sol-gel determini la deformabilità della membrana.

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