Struttura e funzione dei telomeri

Abbiamo sviluppato recettori muscarinici nel lievito per generare una famiglia di recettori accoppiati a proteine ​​G (GPCR) che sono attivati ​​solo da un composto farmacologicamente inerte simile a un farmaco e biodisponibile (clozapina N-ossido). Lo screening successivo in linee cellulari umane ha facilitato la creazione di una famiglia di GPCR muscarinici di acetilcolina adatti per test in vitro e in situ. Abbiamo quindi costruito linee cellulari di muscoli lisci polmonari immortalate con telomerasi umana che   esprimono stabilmente tutti e cinque i membri della famiglia e abbiamo scoperto che ciascuna ricapitolava fedelmente il fenotipo di segnalazione del recettore dello stelo.

Abbiamo anche espresso il progettista del recettore accoppiato a G (i) nei neuroni dell’ippocampo (hM (4) D) e abbiamo dimostrato la sua capacità di indurre l’iperpolarizzazione della membrana e il silenziamento neuronale. Pertanto, abbiamo sviluppato un approccio semplice alla progettazione di famiglie GPCR con specificità del ligando modificata. Tali   GPCR  retroingegnerizzati si riveleranno potenti strumenti per modulare selettivamente le vie di trasduzione del segnale in vitro e in vivo.